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植绒尼龙和棉质取样拭子释放

2013-05-05 12:11:34 周兰 孙馥箐 牛战琴 信息来源:中国知网 点击数:
关键字: 植绒尼龙和棉质取样拭子释放
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植绒尼龙和棉质取样拭子释放

 信息来源:中国知网

周兰 孙馥箐 牛战琴


【摘 要】 目的 比较植绒尼龙及棉质取样拭子对大肠杆菌培养物的吸收能力、释放能力及释放均一性,4 个稀释度的大肠杆菌培养物,分别用植绒尼龙及棉质取样拭子吸取等量的培养物,进行酶联免疫吸附法(ELISA)检测,比较不同拭子对测定结果的影响。结果 以无拭子阳性对照为标准,棉质取样拭子在各个稀释度处吸光度(A)值与阳性对照差异均有统计学意义(P005);而植绒尼龙拭子除在 140 稀释度处有差异,其余各稀释度均与阳性对照差异无统计学意义(P005),明显优于棉质取样拭子;在 1120 稀释度上,植绒尼龙拭子与其相应的空白拭子对照差异有统计学意义(P005),而棉质取样拭子与其相应的空白拭子对照差异无统计学意义(P005)。样本释放均一性方面,植绒尼龙拭 A 值变异系数较小,低于棉质取样拭子。吸水性方面,植绒尼龙拭子需 3~11 s 可将大肠杆菌培养物吸收,而棉质取样拭子需 15~120 s,甚至更长时间。结论 植绒尼龙拭子对大肠杆菌培养物的吸收、释放能力强,释放均一性好,优于棉质取样拭子;在 ELISA 检测临界值附近,棉质取样拭子可能产生假阴性结果。
【关键词】 大肠杆菌;微生物学技术; 酶联免疫吸附测定

盆腔炎性疾病(PID)是指女性上生殖道的一组感染性疾病,该病在临床上多呈隐匿发展,可无症状或出现轻微症状而不为患者重视,若未能得到及时、彻底治疗,可导致不孕、输卵管妊娠、慢性盆腔痛及炎症反复发作,从而严重影响妇女的生殖健康,且增加家庭与社会经济负担 。及时、准确的抗菌药物治疗,是治疗该病重要的甚至是唯一的方法;故病原菌的实验室诊断具有重要意义,其直接指导抗菌药物的使用,进而影响临床疗效;而标本的采集直接决定实验室诊断结果的准确性。
PID
多为多种病原微生物混合感染引起,大肠埃希菌是较常见的内源性致病菌之一,故本研究采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测植绒尼龙拭子及棉质拭子对大肠杆菌培养物的吸收、释放能力及释放均一性,进行对照,以期为临床拭子选择提供参考依据。
1
材料与方法
1
1 材料来源:大肠杆菌临床株由山西医科大学第 一医院细菌培养室提供,取已证实的大肠杆菌临床 株,接种于普通琼脂平板上,CO2 培养箱放置 24 h,进一步分离、纯化,挑取形态规则的菌落加入普通肉 汤培养液中、混匀 (每 1000 ml 蒸馏水中加入 22 g 肉汤培养干粉制成培养液),37 孵育 24 h。后标本 放置于-80 冰箱,备用。
1
2 拭子种类:棉质拭子:购自浙江拱东医疗科技 有限公司,铁杆。植绒尼龙拭子:购自深圳市迈瑞尔科技有限公司,塑料杆。
1
3 试剂与仪器:大肠杆菌 ELISA 试剂盒(购自上 海研辉生物科技有限公司),全自动酶标检测仪 ZX-2,中科院生物物理所航天二院二八三厂),2~8冰箱(新飞 BCD-243KA),37 温箱(DH5000A 型电热恒温培养箱,天津市泰斯特仪器有限公司),CO2 培养箱 (德国 Memmert 公司),-80 冰箱(BD-390LT-86W-I390L,中国海尔公司)。
1
4 拭子的准备:标本反复冻融后,用普通肉汤培养基稀释,选择 l201401801120 4 个稀释度作为待测标本。将配置好的菌悬液分别滴加于 2 种拭子的拭子头,每支拭子滴加 10 μl,观察样本渗入 拭子的时间,并室温放置 2 h 后检测。每种拭子、每个稀释度平行试验 5 孔;每种拭子做拭子空白 5 孔(即拭子只加入普通肉汤培养基);以不加拭子的 4个稀释度样本作为阳性对照,每个稀释度平行试验5 孔。
1
5 实验方法:待测标本采用 ELISA 法检测大肠杆 菌宿主残留蛋白,严格按照说明书操作,在全自动酶 标仪上读取数据。

1 植绒尼龙与棉质取样拭子在不同稀释度处的 A值(x±s

标本种类

标本数

120

140

180

1120

拭子空白

 

 

 

 

 

 

 

植绒尼龙拭子

5

2552±0014

2020±0051

1328±0038

0576±0034

0

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