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紅細胞保存液的技術特點

2013-11-05 19:10:07 華晨陽 www.bobbykray.com 點擊數:
關鍵字: 細胞保存液
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紅細胞保存液的技術特點

1. 產品型號/規格及其劃分說明 1.1 規格    1.2 組成成分及裝量  表1  宮頸脫落細胞保存液主要組成成分 

試劑 含量 三羥甲基氨基甲烷 10 mmol/L 乙二胺四乙酸 1 mmol/L 乙基苯基聚乙二醇  0.02% 氯化鈉  0.06%  配製完畢後,調節pH值至8.0(±0.2)。 2. 性能指標 2.1 外觀  細胞保存液內容物為清亮液體,無色、無絮狀纖維、顆粒雜質,振蕩可產生白色泡沫。 2.2 pH值  在25℃下,測試細胞保存液的pH值,應為8.0±0.2。 2.3 細胞保存效果  2.3.1 將人體細胞株懸液加到細胞保存液中,提取DNA,PCR擴增後進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,應有效檢出人β球蛋白基因(250bp),且條帶位置正確,無HPV基因檢出。  2.3.2  將插入HPV18型L1基因的Hela細胞懸液加到細胞保存液中,提取DNA,PCR擴增後進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,應有效檢出人β球蛋白基因(250bp)和HPV基因(450bp),且條帶位置正確。 2.4 批間差 

 

- 2 -    三個批次細胞保存液的pH應≤0.3。 3. 檢驗方法 3.1 外觀  目測外觀,應符合2.1的要求。 3.2 pH值  在25℃下用pH計測定細胞保存液的pH值,應符合2.2的要求。 3.3 細胞保存效果  3.3.1 將人體細胞株懸液加到細胞保存液中,使其終濃度為50個細胞/μL,提取保存液中DNA,使用β球蛋白基因引物和HPV通用引物MY09/11擴增後進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,結果顯示為有效檢出人β球蛋白基因(250bp),且條帶位置正確,無HPV基因檢出,符合2.3.1的要求。  3.3.2  將插入HPV18型L1基因的Hela細胞懸液加到細胞保存液中,使其終濃度為50個細胞/μL,提取保存液中DNA,使用β球蛋白基因引物和HPV通用引物MY09/11擴增後進行瓊脂糖凝膠電泳檢測,結果顯示為有效檢出人β球蛋白基因(250bp)和HPV基因(450bp),且條帶位置正確,符合2.3.2的要求。 3.4 批間差  抽取三個批次的細胞保存液,25℃下,分別用pH計測定其pH值,計算最大pH值與最小pH值之差,即ΔpH,應符合2.4的要求。

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